核酸蛋白檢測(cè)儀的基本操作步驟
更新時(shí)間：2019-03-26 點(diǎn)擊次數(shù)：2849次
核酸蛋白檢測(cè)儀又稱紫外檢測(cè)儀，是液相色譜實(shí)驗(yàn)中的一種紫外檢測(cè)器，配上層析樁、蠕動(dòng)泵、部分收集器和記錄儀等就組成了一套完整的液相色譜系列裝置。核酸蛋白檢測(cè)儀可直接讀出光密度A值，且波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和重復(fù)性高、單色性好、定性、定量分析中能直接記錄各個(gè)峰面積的相對(duì)峰面值，并能計(jì)算質(zhì)量相對(duì)的含量。是生物化學(xué)、分子生物學(xué)、基因工程、制藥、化工、農(nóng)業(yè)、食品以及醫(yī)院籌有關(guān)科研部門和生產(chǎn)單位在分離分析工作中不可缺手段。
核酸蛋白檢測(cè)儀是自動(dòng)液相色譜分離層析儀中分離具有紫外吸收物質(zhì)(蛋白、核酸、多肽、酶)的種紫外檢測(cè)裝置，其原理是根據(jù)物質(zhì)（樣品）對(duì)紫外光有明顯吸收的特征，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品成份含量比對(duì)分析，以便進(jìn)行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識(shí)別檢測(cè)和含量測(cè)定?？芍苯幼x出光密度A值，且波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和重復(fù)性、單色性好、定性、定量分析中能直接記錄各個(gè)峰面積的相對(duì)峰面值，并能計(jì)算質(zhì)量相對(duì)的含量。
⑴在核酸蛋白檢測(cè)儀使用前，首先連接好所需配套儀器：層析柱、恒流泵、自動(dòng)部分收集器、記錄儀(色譜工作站)。將各類插頭與插座接妥(220v電源)。
?、瓢聪聶z測(cè)儀on電源開關(guān)，電源指示燈亮，說明整臺(tái)儀器電源開始工作，然后觀察光源指示燈，如果亮了，表示光源已開始工作，整臺(tái)儀器可進(jìn)入工作狀態(tài)，將檢測(cè)儀波長(zhǎng)旋鈕旋到所需波長(zhǎng)刻度上，把量程旋鈕撥到100%t檔(儀器預(yù)熱20分鐘，待基線平直后可加樣測(cè)試)。
⑶接通記錄儀電源開關(guān)，使電源開關(guān)撥到“通”指示燈亮。可根據(jù)記錄儀說明書調(diào)換不同的紙速度，用戶根據(jù)需要自行掌握，測(cè)量用10mv檔。此時(shí)記錄儀指針從零點(diǎn)開始向右移動(dòng)某一刻度，調(diào)節(jié)檢測(cè)儀“光量”旋鈕使指針停留在記錄儀大約中間位置5mv左右數(shù)字顯示為50左右。。
⑷把核酸蛋白檢測(cè)儀進(jìn)樣口聚乙烯塑料管接到恒流泵上，使凝膠層析柱中緩沖液流過檢測(cè)儀(恒流泵流量視凝膠層析柱大小選1-3ml/min)。用“調(diào)零”調(diào)整吸光度a值為0(量程開關(guān)撥到100%t調(diào)節(jié)光量旋鈕，使記錄儀指針在10mv數(shù)字顯示為100，即透光率為100%。把量程開關(guān)撥到“0.0”檔，緩慢調(diào)節(jié)a調(diào)零旋鈕，使記錄儀指示在“o”位，檢測(cè)儀顯示為“o”)。
?、梢陨喜襟E結(jié)束，析系統(tǒng)平衡后即可用洗脫液開始洗脫樣品，洗脫前再調(diào)一次吸光度0點(diǎn)。洗脫過程結(jié)束前不可再調(diào)節(jié)“調(diào)零”旋鈕。當(dāng)洗脫液流過檢測(cè)儀時(shí)，吸光度顯示大于零的數(shù)值，吸光度數(shù)值大小隨樣品的濃度而變化。洗脫完畢后吸光度顯示為稍大于零的數(shù)值。
?、蕯?shù)字顯示吸光度和記錄儀自動(dòng)繪制吸光度圖譜是兩個(gè)互相獨(dú)立的檢測(cè)系統(tǒng)，數(shù)字顯示吸光度與記錄儀所繪峰值大小沒有直接關(guān)系，不可互相換算。
